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小分子干扰RNA介导RhoA沉默优化骨髓间充质干细胞的培养

日期:2022.07.11 点击数:0

【类型】期刊

【题名】小分子干扰RNA介导RhoA沉默优化骨髓间充质干细胞的培养

【期刊名】中国组织工程研究与临床康复

【作者】 吕刚1,姚鑫2

【作者单位】1天津医科大学研究生院;2天津市环湖医院神经外科

【关键词】 RNA干扰 细胞培养 骨髓间充质干细胞 干细胞培养 RhoA

【摘要】 背景:以往骨髓间充质干细胞的培养方法存在衰老和分化率低等问题。目的:检测是否可以通过沉默RhoA基因的方法优化骨髓间充质干细胞培养。方法:体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,经小分子干扰RNA转染以沉默RhoA基因表达,分为3组培养:干细胞组(未转染小分子干扰RNA)、经随机打乱顺序的小分子干扰RNA转染干细胞组、经小分子干扰RNA转染的干细胞组。用RT-PCR,Westernblot检测骨髓间充质干细胞在转染前后RhoA基因和蛋白的表达。应用细胞生长曲线、MTT比色法观察细胞生长的优化作用,采用流式细胞术测定细胞周期分布的变化。结果与结论:与干细胞组、经随机打乱顺序的小分子干扰RNA转染干细胞组比较,经小分子干扰RNA转染的干细胞组RhoA基因和蛋白表达量明显降低(P<0.05),细胞的生长速度明显增快,细胞周期G0/G1期减少,S期细胞数增多(P<0.05)。说明通过沉默RhoA基因的方法可以促进骨髓间充质干细胞增殖,优化培养方法。

【年份】 2010

【issn】 2095-4344

【卷期】 第45期

【卷期】 第45期

【页码】 8365-8368

【中图分类】 R329

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